胰蛋白酶,作為絲氨酸蛋白酶家族的一部分,是一種肽鏈內(nèi)切酶,能夠在賴氨酸和精氨酸的C端精確切割肽鏈。這種生物原材料在生物制品的生產(chǎn)過程中具有廣泛的應(yīng)用價值。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,胰蛋白酶可分解細(xì)胞間的粘蛋白和糖蛋白,使得細(xì)胞之間能夠彼此分離,從而順利進(jìn)行傳代培養(yǎng);在病毒類疫苗的生產(chǎn)過程中,在病毒培養(yǎng)階段加入適量胰蛋白酶,以促使病毒抗原暴露并與細(xì)胞受體結(jié)合,從而提高了病毒感染效率;在重組蛋白制品的生產(chǎn)中,如重組胰島素的生產(chǎn),胰蛋白酶也被用作剪切酶,將胰島素原轉(zhuǎn)化為具有生物活性的胰島素,這不僅提高了胰島素的產(chǎn)量,而且保證了胰島素的生物活性。
當(dāng)前使用較廣泛的胰酶是從動物胰臟浸出液中提純凍干后制備而成的,其原料主要來自豬或牛的胰臟。盡管動物源胰酶制備過程中采用了適當(dāng)?shù)募兓に?,但由于動物本身可能攜帶多種病毒,如瘋牛病病毒、朊病毒、豬瘟病毒等,加上受到制備工藝、生物原材料的特性和當(dāng)前檢測手段的限制,動物源胰酶存在較高的外源病毒污染風(fēng)險,可能對生物制品的安全性造成影響。使用重組生物原料替代動物源原料是生物制品生產(chǎn)的主要安全和風(fēng)險控制手段,中國藥典2020版也收錄了重組胰蛋白酶的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),并且隨著DNA重組技術(shù)的不斷發(fā)展,生物技術(shù)藥物優(yōu)勢越來越明顯,對重組胰蛋白酶的需求也將不斷增加,據(jù)廣州恒州誠思信息咨詢有限公司發(fā)布的《2022年全球及中國重組胰蛋白酶行業(yè)頭部企業(yè)市場占有率及排名調(diào)研報告》顯示,2021年中國重組胰蛋白酶市場銷售收入達(dá)到了651萬美元,預(yù)計2028年可以達(dá)到1137萬美元,2022-2028期間年復(fù)合增長率(CAGR)為8.22%。
監(jiān)管相關(guān)文件及政策
國家藥監(jiān)局于2019年9月發(fā)布了《疫苗上市后生產(chǎn)工藝變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則》(征求意見稿),如果疫苗生產(chǎn)要進(jìn)行符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的原輔料變更,只需備案,即通過變更流程的簡化,鼓勵企業(yè)進(jìn)行無動物源性原輔料的變更。
中國藥典2020版三部“生物制品病毒安全性控制”章節(jié)中明確指出:“原材料及輔料應(yīng)符合‘生物制品生產(chǎn)用原材料及輔料質(zhì)量控制’的相應(yīng)要求,應(yīng)盡可能選擇無病毒安全性風(fēng)險或低風(fēng)險的原材料和輔料用于生物制品生產(chǎn),如選擇采用重組技術(shù)生產(chǎn)的生物材料替代動物源性生物材料”,并增加了重組胰蛋白酶的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(中國藥典2020年版3603)。相關(guān)實驗數(shù)據(jù)
圖1 .無動物成分的rTrypsins具有與天然Trypsin相同的細(xì)胞分離效果。
圖2A . Vero細(xì)胞形態(tài)學(xué)顯示Sheffield?rTrypsin比其他市售重組胰蛋白酶分離細(xì)胞快。
圖2B. Sheffield rTrypsin比其他市售重組胰蛋白酶解離細(xì)胞時間更短。
圖3 . Sheffield?rTrypsin和其他市售重組胰蛋白酶均未發(fā)現(xiàn)明顯毒性。
圖4 . 所有rTrypsins消化傳代后的細(xì)胞倍增水平顯示這些rTrypsins對細(xì)胞沒有明顯毒性。
實驗結(jié)果顯示,所有的胰蛋白酶在都能有效地分離單層細(xì)胞,表明rTrypsin可以代替天然胰蛋白酶進(jìn)行細(xì)胞分離(圖1 )。然而,這些被評估的胰蛋白酶都不能完全分離緊密的細(xì)胞團(tuán)塊。在消化單細(xì)胞層所需的時間方面,與其它商品化rTrypsin相比,Kerry Sheffield? rTrypsin酶解速度更快(圖2A & B )。細(xì)胞毒性研究表明,所有市售rTrypsins的細(xì)胞活率和細(xì)胞倍增時間均相近,表明重組胰蛋白酶對細(xì)胞無明顯毒性(圖3、4 )。
Kerry Sheffield?rTrypsin ACF重組胰蛋白酶的優(yōu)點:
- 安全:無動物源成分,避免了外源病毒污染風(fēng)險,保障了生物安全性。
- 高效:多種細(xì)胞類型適用,且消化效率高、溫和,不傷細(xì)胞,提高細(xì)胞培養(yǎng)效率和成功率。
- 穩(wěn)定:基因序列來自微生物胰酶,室溫放置一個月不會降低活性,穩(wěn)定性強。
- 簡便:實驗操作簡便,無需洗細(xì)胞表面和添加胰酶抑制劑,節(jié)省時間提高效率。
Kerry Sheffield?rTrypsin ACF產(chǎn)品列表
貨號 |
英文名稱 |
中文名稱 |
規(guī)格 |
30624799.02 |
Sheffield?rTrypsin ACF |
無動物源重組胰酶 |
100mg |
30624799.1GR |
Sheffield?rTrypsin ACF |
無動物源重組胰酶 |
1g |
30624799.5GR |
Sheffield?rTrypsin ACF |
無動物源重組胰酶 |
5g |
免費試用申請
為了滿足廣大客戶的需求,Sheffield? rTrypsin ACF免費試用活動已開啟,即日起至2023年12月31日,關(guān)注“西美杰微信公眾號(微信號xmjsci)”,發(fā)送關(guān)鍵詞“重組胰酶”,填寫試用調(diào)查問卷即可獲得免費試用機會,數(shù)量有限,先到先得。
美國Kerry集團(tuán)旗下Sheffield Bio-Science服務(wù)于全球超過70年,作為全球生物制藥疫苗行業(yè)規(guī)模大專業(yè)性強的細(xì)胞營養(yǎng)原料供應(yīng)商,已成為全球單個藥物年銷售額超過10億美金的10個“生物炸彈藥”中7個生物藥的培養(yǎng)基原料供應(yīng)商,是全球少有的同時生產(chǎn)酵母粉和蛋白胨并針對不同細(xì)胞株/菌種開發(fā)提供非動物源性復(fù)合添加物系統(tǒng)的生產(chǎn)商,引領(lǐng)全球制藥、疫苗、無血清培養(yǎng)基、傳統(tǒng)發(fā)酵和診斷培養(yǎng)基工業(yè)的發(fā)展。
北京西美杰科技有限公司為Kerry集團(tuán)細(xì)胞培養(yǎng)系列產(chǎn)品中國總代理,為客戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www.cbhcz.cn了解更多信息。