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新品上市 | 耐高鹽全能核酸酶DENARASE? High Salt


DENARASE® High Salt 是一種經(jīng)過生物工程改造的野生型 Serratia marcescens 內(nèi)切酶,通常用于生物工藝中的 DNA 去除。與野生型 DENARASE® 相比,該酶的幾個(gè)氨基酸被替換以提高其耐鹽性,而不會(huì)失去其對核酸的特異性。DENARASE® High Salt 在更廣泛的鹽濃度和 pH 范圍內(nèi)保持更高的活性,為客戶提供了更大的工藝靈活性,同時(shí)為病毒載體制造工藝提升成本效益,尤其是在需要較高鹽濃度的條件下由于與野生型核酸內(nèi)切酶具有很高的相似性,DENARASE® High Salt 可以使用與野生型酶相同的核酸內(nèi)切酶 ELISA試劑盒進(jìn)行檢測,例如DENARASE® ELISA試劑盒,Cygnus核酸內(nèi)切酶殘留檢測試劑盒(EonucleaseGTP ELISA,貨號F960。

 

DENARASE® High Salt的生產(chǎn)采用c-LEcta成熟的專利DENARASE®生產(chǎn)工藝,該工藝采用革蘭氏陽性芽孢桿菌菌株Bacillus.sp.表達(dá)大大降低了內(nèi)毒素殘留風(fēng)險(xiǎn)。該酶按照ISO 9001標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),不使用抗生素和動(dòng)物源性原料或TSE/BSE風(fēng)險(xiǎn)原料。

 

DENARASE® High Salt酶特性

DENARASE® High Salt是專為在更高、與工藝相關(guān)的鹽濃度下實(shí)現(xiàn)DNA清除活性而設(shè)計(jì)的。該工程酶在0-500 mM一價(jià)陽離子濃度范圍內(nèi)具有活性(見圖1)。

https://denarase.c-lecta.com/hs-fs/hubfs/Effect%20of%20Naci.png?width=2000&name=Effect%20of%20Naci.png

1. NaCl對酶活性影響

 

鎂離子(Mg2+)是確保DENARASE® High Salt發(fā)揮酶活性所必需的輔因子。DENARASE® High Salt低鎂離子濃度(5-25 mM Mg2+)下具有基本活性,但在高鎂離子濃度(>25 mM Mg2+)下酶活性會(huì)降低。因此,在使用DENARASE® High Salt時(shí),應(yīng)確保鎂離子濃度在適當(dāng)范圍內(nèi)(見圖2)。

https://denarase.c-lecta.com/hs-fs/hubfs/Effect%20of%20Magnesium.png?width=2000&name=Effect%20of%20Magnesium.png

圖2. Mg2+對酶活性影響

 

 

DENARASE® High Salt質(zhì)量參數(shù)

DENARASE® High Salt產(chǎn)品為液體形式,配方為20 mM Tris-HClpH 7.4±0.2)、250 mM NaCl、5 mM MgCl250%(體積比)甘油。

項(xiàng)目

方法

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

產(chǎn)品性狀

直接觀測

澄清透明液體

酶活性

光學(xué)測定1

>250 U/μL

純度

SDS-PAGE和銀染

≥ 99%

比活性

光學(xué)測定單位蛋白具有的酶活性即280 nm下44,600 L x mol-1 x cm-1的摩爾消光系數(shù)

>5 x 105 U/mg

內(nèi)毒素

LAL-Test,參考 Ph. Eur. 2.6.14, 方法C

<0.25 EU/kU

總菌落數(shù)

TAMC/TYMC 參照 Ph. Eur. 2.6.12

需氧菌: < 5 cfu/200 μL

酵母: < 5 cfu/200 μL

1. Unit定義: 每個(gè)活性單位 (U) 指在37 °C ,pH 8.0 條件下,30分鐘內(nèi)將鮭魚精DNA消化至相當(dāng)于ΔA260nm值為1.0 的酸溶性寡聚核苷酸。

 

DENARASE® High Salt產(chǎn)品參數(shù)


  • 分子量: 27 kDa
  • 最適pH: pH 7.4 - 9.0
  • 最適反應(yīng)溫度:37 °C
  • 等電點(diǎn)(pI)7.831
  • 輔因子:Mg2+


 

DENARASE® High Salt訂購信息

品名

貨號

規(guī)格

DENARASE High Salt 25 kU

22002-25k

25 kU

DENARASE High Salt 100 kU

22002-100k

100 kU

DENARASE High Salt 500 kU

22002-500k

500 kU

DENARASE High Salt 1000 kU

22002-1000k

1000 kU

DENARASE High Salt 5000 kU

22002-5000k

5000 kU

 


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